囊胚期胚胎二次浓缩复苏移植1例的出生结局和儿童发育情况随访

夙殖细胞的保鲜保存是正因如此夙殖技心法(ART)治疗法中都的不可忽视组转成部分，通过保鲜保存可以将病征不必要的夙殖细胞保存从年前，提升病征的再加孕期叛将。夙殖细胞的 保鲜保存可以在夙殖细胞受精的任意阶段性展开，如有的中都心正因如此保鲜脱氧核糖核酸期夙殖细胞或卵裂期夙殖细胞，现在随着养转成猪制度化的完善，更加多的IVF中都心展开幼体培 养猪以期提升孕期叛将和降低多胎孕期叛将，因此学心法史家更倾向于展开幼体保鲜保存。保鲜新方法可以为程序 所谓慢保鲜，也可以为活性炭保鲜。我们中都心自 2004年起，对第3天移植版后的夙殖细胞全部展开幼体养转成猪，如有幼体转变转成则展开活性炭保鲜保存。然而在诊疗实习中都经常长时间存在一些偶发的意外原因，如病征在自是苏移植版日因心肌梗塞性原因无法展开夙殖细胞移植版，只能将自是苏的夙殖细胞丢弃或随即保鲜后择期自是苏移植版。但是我们无法明确幼体二次活性炭保鲜后的兼容性如何。目年前关于人类所夙殖细胞二次保鲜的史料较少，尽管有史料另据了一些遭遇叛将需要在夙殖细胞二次保鲜自是苏移植版后取得活产，但这些另据多为第一次保鲜为脱氧核糖核酸 期夙殖细胞或卵裂期夙殖细胞，自是苏后养转成猪至幼体随即保鲜[1。4]。Kumasako等[3]认为二次保鲜不亦会降低胚 胎的种植叛将，但是关于幼体保鲜自是苏后随即保鲜自是 苏移植版的另据大多。且据我们出名，尚无学心法研究来分 析幼体二次活性炭保鲜自是苏移植版后的外祖父结尾。在 此遭遇叛将另据中都，我们所述了幼体二次保鲜自是苏移植版 后新的夙儿的外祖父结尾，并严厉批评病征的孩子展开长时间 随访观察，详细记录了此幼儿的身体素质受精原因。一、诊疗资料病征34岁，妹妹35岁，因输卵管因素原发不孕 到我院夙殖中都心求医，不孕时数6年。根据世界镇抚 夙有组织标准，长辈参数短时间。病征2005年在本 中都心展开夙殖细胞刺激后**，在**时间段所使用的；也 排卵方案按照本中都心的正因如此展开，在上一时间段的黄 体期开始分析新方法；也性腺激素释收激素激动剂(GnRH-a)，当垂体达到降调节后，用乳腺蓝斑(FSH，果纳芬，默克)展开夙殖细胞刺激。当主导乳腺cm达到18～ 20 rnlTl时，注射人绒毛膜；也性腺激素(HCG，艾泽，默克)，38 h后展开超声引导的乳腺穿刺来获取输卵管膜。共取得13枚输卵管膜，展开正因如此授精后， 13枚输卵管膜受精，在受精后第3天观察夙殖细胞的卵裂原因，挑选2枚优质夙殖细胞展开移植版。移植版后悉数的 11枚卵裂期夙殖细胞经病征知悉同意后全部展开幼体养转成猪，在受精后第5日或第6日分别观察幼体转变转成原因及形态。使用Gardner分数系统对对幼体展开分数，该病征共转变转成2枚幼体，幼体分数共五4BB和4BC。将所转变转成的幼体按照我中都心正因如此新方法[5]展开活性炭保鲜，明确操为：幼体保鲜年前展开人工皱缩，即用雷射 系统对在已远离内细胞膜团的经年累年底猪细胞膜连接薄弱处打孔，让囊腔液流出，使细胞膜皱缩四人；然后将幼体收入含有7．5％DMSO和7．5％乙二醇的预平衡液中都平衡 2 min，之后迁入活性炭保鲜液中都平衡30 s，将夙殖细胞转 移至保鲜环(cryoloop环)上，直接浸入氩气保存。 病征新的鲜时间段移植版仍未取得孕期，**3个年底活命 者展开保鲜幼体自是苏移植版。人工时间段作准备增夙，妊娠 第2"-4天行正因如此B超健福检查，给予戊酸甘氨酸(补佳乐，先灵，荷兰)药物，药物药物根据病征以往的增夙原因 调整(2～18 rag／d)。B超监测增夙多见于原因，当增夙厚 度达到8 ITlln时肌肉注射黄体酮(20 rng×2 d，40 mgX 2 d，20----一40 mg×1 d)，注射后第6天行幼体自是苏移植版。移植版年前1 d按照我中都心正因如此新方法[5]展开幼体自是苏：作准备幼体自是苏液，在夙殖细胞养转成猪皿内配制0．33 mol／L、0．2 mol／L蔗糖溶液和基础养转成猪液(GMoPS Plus， Vitrolife，瑞典)，从氩气中都取出背著有幼体的保鲜环，热空气 中都停留5 S后，将夙殖细胞依次浸入上述自是苏液中都，时间分 别为2 min、3 min和5 min。自是苏后的2枚幼体均展开 雷射正因如此无齿所谓，选择在已远离细胞膜团的绿色背著上部位大块绿色背著的1／4差不多。之后将幼体移人提年前作作好的 幼体养转成猪液(G2，ⅥnDlife，瑞典)中都，收置37℃、6％OQ 和5％Q养转成猪箱内养转成猪16 h。移植版年前观察幼体的扩展到 和转成体原因。 该病征在幼体自是苏移植版日心肌梗塞急性并发症很难 展开幼体移植版，在病征知悉同意的年前提下随即按照上述幼体活性炭保鲜操作步骤展开夙殖细胞保鲜。病征手 心法6个年底后随即展开保鲜幼体自是苏移植版，明确操作步骤同上，幼体自是苏后16 h展开移植版，病征取得转成功孕期，并于孕38周分娩一健福女婴，体长52 CITI，BMI3 550 g。 由于这是本中都心第1例幼体二次保鲜的病征，所以我们对其女展开了长时间的随访。孩子的父亲身材矮小为 185 cm，母亲身材矮小为167 cm孩子1岁时，身材矮小83 cm， BMI12 kg；3岁时，身材矮小97cm，BMI21kg，身体健 福，无哮喘；5岁时，身材矮小117 cm，BMI31 kg；7岁时，身材矮小135cm，BMI40 kg；9岁时身材矮小154cm，BMI50 kg；12岁时，身材矮小168 cm，BMI62 kg；10岁时，出现受精；12岁时妊娠初潮。该女孩性格开朗，参加学校管乐团、校校队等集体活动，并取得很好的转成绩，其智力短时间，进修转成绩在班级年前5名。二、讨论在此遭遇叛将中都，病征取得13枚转成熟输卵管膜，13枚输卵管膜受精，经过养转成猪后转变转成2枚幼体并油漆 所谓保鲜保存。病征在预定幼体自是苏移植版日心肌梗塞急性并发症，在其知悉同意的年前提下将自是苏后的幼体随即保鲜保存。此为诊疗实习中都一些难以避免的原因。如果将病征夙殖细胞丢弃极其可惜，而夙殖细胞随即保鲜保存 的兼容性尚不明确。到目年前，虽然之年前有一些胚 胎在二次保鲜后取得活产的遭遇叛将另据，但都是第一次 夙殖细胞保鲜时曾脱氧核糖核酸期或卵裂期夙殖细胞，自是苏后养转成猪至幼体阶段性随即保鲜。本学心法研究是首次对幼体二次活性炭 保鲜后取得的活产展开长时间随访的遭遇叛将另据。 有史家曾经用小鼠夙殖细胞学心法研究一再保鲜自是苏对夙殖细胞的冲击，他们推断出与仍未保鲜的夙殖细胞相比，保鲜夙殖细胞 在转成体时的细胞膜数稍少，且小鼠夙殖细胞需要在取得转成功的 一再保鲜自是苏3次后仅仅具有体内受精能力也[6]。在此遭遇叛将中都，我们对比了两次保鲜年前后幼体的遗传学变所谓，第1次保鲜是在第5天，幼体为4期，质量为 4BB，第一次自是苏后养转成猪16 h，幼体实际上转成体，带进 6期幼体，质量为6BB；第2次保鲜自是苏后，养转成猪16 h 幼体质量为6BB。幼体形态从外观上看，两次保鲜后 很难相像之处，幼体细胞膜存活良好，貌似幼体阶段性夙殖细胞的 二次活性炭保鲜对夙殖细胞的受精无太大冲击。分析原 因，我们认为或许与以下几个不足之处有关。首先，幼体在保鲜之年前展开了雷射皱缩，将幼体腔内液全部收 出，使幼体腔碎裂，待幼体实际上皱缩后再展开幼体的 活性炭保鲜，这样需要减少保鲜全过程中都冰晶的转变转成， 降低对夙殖细胞的损伤。有学心法研究也证实幼体的人工皱缩 需要有效提升幼体保鲜后自是苏的存活叛将[7-9]。而且保鲜幼体自是苏后的正因如此无齿所谓也极其不可忽视，在夙殖细胞保鲜全过程中都，人类所幼体的绿色背著溶化，亦会限制夙殖细胞的向外无齿 出，有学心法研究认为幼体在扩展到全过程中都；也使地膨胀皱缩， 如果在绿色背著出口处卡的周内多了，幼体就亦会衰亡[10]。而且，保鲜自是苏后的幼体，由于不久年前自是苏后囊 胚腔还处于皱缩状态，夙殖细胞和绿色背著间的缝隙已远已远 大于卵裂期夙殖细胞的缝隙，因此幼体的正因如此无齿所谓更确保。我们的数据推断出，仍未经过正因如此无齿所谓的幼体，自是苏后过夜养转成猪，实际上转成体的比率(340A)已远低于雷射无齿所谓后的幼体(85％)，更佳的转成体比率意味着更佳的着床 机亦会。其次，幼体的保鲜保存不同于卵裂期夙殖细胞，它 自身有很多优点。需要受精至幼体阶段性的夙殖细胞经过 二次选择，受精能力也异经常的夙殖细胞之年前被淘汰；幼体的 细胞膜数目多，尤其是经年累年底猪细胞膜层细胞膜，损伤后修自是能力也过关斩将，少数细胞膜死亡后对夙殖细胞受精能力也冲击小；幼体 的细胞膜更小，呈梭形，表面积／半径比大，对水解、自是水产夙的半径变所谓耐受更佳[11]。因此我们猜测幼体 二次保鲜后细胞膜很难损伤的原因或许与此有关。 目年前虽然有一些夙殖细胞二次保鲜取得活产的报 道，但是对新的夙儿长时间随访的另据极其少见。在此遭遇叛将中都，幼体经过二次活性炭保鲜后，仅仅需要取得转成功 种植，病征在足年底分娩一短时间BMI的新的夙儿，也提示 幼体二次保鲜却是却是冲击新的夙儿的外祖父结尾。自是习史料，我们推断出在2011年的一项小型学心法研究中都，作 者分析了一次保鲜和二次保鲜后夙殖细胞外祖父结尾的更差 异[12]。在中曾都一次保鲜，就是将2PN期或卵裂期的夙殖细胞展开保鲜保存，自是苏后移植版；二次保鲜仅指的是 保鲜的夙殖细胞自是苏后展开体内养转成猪至幼体阶段性，再进 行保鲜。结果提示二次保鲜组的双胎叛将低于一次保鲜组，他们认为是二次保鲜组移植版的夙殖细胞数较少造 转成的。此学心法研究还提示二次保鲜组的外祖父BMI稍高于 一次保鲜组，尽管很难统计学相像之处；在二次保鲜组仍未 遭遇先天异经常，在一次保鲜组遭遇1例先天异经常；两 组均仍未遭遇死胎或新的夙儿死亡。尽管这些并非幼体 二次保鲜的学心法研究，但从一定相对上反映了夙殖细胞在二 次保鲜后却是冲击新的夙儿的外祖父结尾。我们严厉批评新的 夙儿随访至9岁，该幼儿身体素质受精短时间，智力受精正 经常，病态受精短时间。与之年前冻融夙殖细胞移植版(FET)出 夙幼儿的随访结论一致[13,7]。Pelkonen等分析 了FET外祖父孩子的先天异经常的遭遇原因，认为 FET外祖父孩子遭遇先天异经常的比率与新的鲜移植版相像，之后Pelkonen等[14]对FET子孙孩子展开了一 项随访3年的学心法研究，推断出FET与新的鲜移植版外祖父子孙 的身体素质受精是相像的。还有学心法研究推断出ART后外祖父 子孙的脑运动受精不足之处与自然孕期子孙无显著更差 异，认为他们的脑受精、社亦会感情及句法进修并无 相像之处[117]。可见夙殖细胞保鲜对新的夙儿长时间受精的影 响与新的鲜移植版夙殖细胞相像。而从我们的遭遇叛将另据来 看，幼体的二次保鲜也是相对确保的。 我们将幼体二次活性炭保鲜后的夙殖细胞展开移植版 后取得取得转成功孕期，足年底分娩一健福女婴，并展开长达12年的随访，此幼儿身体素质受精短时间，智力受精短时间，病态受精短时间。认为此幼体二次保鲜后夙殖细胞仅仅具有很好的种植意念和受精意念。但此遭遇叛将仅为个例另据，幼体一再保鲜是否是亦会产夙夙殖细胞的损伤仍不明 确，移植版一再保鲜的夙殖细胞是否是确保还需要进一步的学心法研究，因此在诊疗实习中都，我们仍应尽或许避免夙殖细胞的一再冻融。参考史料稍。早期出处：王雪，甄绿然，孙正怡，郁琦等，幼体期夙殖细胞二次保鲜自是苏移植版1例的外祖父结尾和幼儿受精原因随访[J],夙殖医学杂志，2018,27(12).